標題:臨床輸血前免疫血液學(xué)檢查 | ||
臨床輸血前免疫血液學(xué)檢查 一、輸血前檢查的目的和要求 輸血前檢查的目的是選擇與患者血型配合的各種血液成分,使之能在患者體內(nèi)有效地存活,無不良反應(yīng),從而達到安全、有效輸血的目的。 二、輸血前檢查的內(nèi)容 輸血前檢查的內(nèi)容包括如下幾個方面: 1.患者的病史和標本等的檢查、核對及處理。 2.受血者、獻血者ABO和Rh血型鑒定。 3.不規(guī)則抗體的篩選和鑒定。 4.交叉配合試驗。 5.血小板輸注前的抗體檢查和配合試驗。 6.交叉配血結(jié)果的報告和發(fā)血。 (一)受血者的病史和標本等檢查、核對及處理 1. 病史資料和信息 受血者的有關(guān)資料,包括受血:者姓名、年齡、性別、床號、種族、臨床診斷、輸血史、藥物史、妊娠史,特別是以往輸血反應(yīng)的記錄等等,有助于解決有可能出現(xiàn)的血清學(xué)問題。 2.標本的要求 要求不超過3天的期限,反復(fù)輸血的受血者更應(yīng)注意抽取新的標本作配血試驗,避免因回憶反應(yīng)而產(chǎn)生的抗體漏檢。如果患者使用肝素治療,則應(yīng)用魚精蛋白,使標本凝結(jié)。如果患者使用右旋糖酐等治療,應(yīng)注意將紅細胞作洗滌。 (二)受血者和供血者ABO和Rh定型 1.ABO定型 最適的反應(yīng)溫度為4℃,但在室溫反應(yīng)良好,所以常規(guī)的ABO定型試驗僅在室溫進行。 (1)定型方法:正、反定型的試管離心方法目前仍被認為是最可信賴的ABO定型方法。 1)定型試劑:有些ABO血型診斷試劑是以人的血清匯聚而制成的,但必須具備以下條件:第一,高效價(1:128)的IgM抗A或抗B。第二,具較好的親和性并不含冷凝集素。第三,必需具有檢測A2,A2B血型的能力。第四,血清必須通過HIV,HCV,HBV等檢查或經(jīng)病毒滅活。另外一些ABO定型試劑是由來自培養(yǎng)細胞株的單?si】固逅瞥傘?br>2)ABO亞型的鑒定:ABO亞型的鑒定通常使用下列試劑:抗A、抗B、抗A1、抗H、抗AIA1紅細胞、A2紅細胞、B型紅細胞和O型紅細胞。有些工作者在定型試驗中,常規(guī)地選擇應(yīng)用抗AB抗血清,以避免錯誤地把弱反應(yīng)性A或B型紅細胞分類為O型。一般抗AB試劑對Ax型紅細胞可增加凝集反應(yīng)的強 ……(快文網(wǎng)http://www.hancun.net省略1467字,正式會員可完整閱讀)……
3. 弱D型(Du型)的臨床意義 盡管Du比正常D陽性細胞抗原弱,但輸給Rh陰性的受血者后,自然有免疫產(chǎn)生抗D的可能。同時若接受Rh陽性的細胞后,Du型人也有可能產(chǎn)生抗D抗體。因此,作為供血者,Du型歸類為Rh陽性,作為受血者Du型者歸類為Rh陰性者。 (三)不規(guī)則抗體篩選和鑒定 1.目的和原則 對受血者的血清和血漿,應(yīng)作常規(guī)的抗體篩選試驗,以發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體,所謂不規(guī)則抗體是指抗A和抗B以外的血型抗體。 抗體篩選試驗可在交叉配合試驗之前進行或一起進行,這樣有利于對患者抗體的早期確認及鑒定臨床上具有意義的抗體,避免一些可能的情況而造成病情的延誤。 抗體篩選試驗的原則是讓受檢的血清與已知血型的試劑紅細胞即篩選紅細胞起反應(yīng),以發(fā)現(xiàn)在37℃中有反應(yīng)的抗體。 2.抗體篩選和鑒定技術(shù) 抗體篩選試驗用的試劑篩選紅細胞,通常是2或3個人份的O型紅細胞成為一套試劑,每套試劑篩選紅細胞中至少有以下常見的抗原:D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Lea、Leb、K、k、Le、Fya、Fyb、Jka、Jkb,條件不足的實驗室不一定具備Lua、V、Cw、Kpa、Jsa 類的抗原。 抗體篩選試驗不一定能檢出所有臨床意義的抗體,一些抗低頻率抗原的抗體或有劑量效應(yīng)的抗體,可能被漏檢。這時需安排抗原性更完全和特異性更強的篩選細胞做試驗,或用敏感度更高的技術(shù)做檢查。 一旦抗體被檢出,應(yīng)作抗體鑒定試驗,以確定其特異性?贵w鑒定實驗包含以下主要內(nèi)容: (1)自身細胞檢查:觀察患者(受者)的血清與患者(受者)自身細胞的反應(yīng)情況,確定血清內(nèi)是否有自身抗體或自身抗體和同種抗體二者同時存在。 (2)使用試劑細胞中的譜細胞,應(yīng)用各種抗體檢查技術(shù),檢測患者的血清,確定其抗體的特異性。 試劑譜細胞一般是由8--16個人的已知血型的O型紅細胞配套組成,具有各種不同的抗原成分,根據(jù)譜細胞的反應(yīng)格局一般可以鑒定常見的抗體。選擇不同的譜細胞,可以鑒定不同特異性的抗體 (3)當患者體內(nèi)的同種抗體有二種或二種以上時,可采用吸收放散試驗。 作抗體鑒定時,必須靈活應(yīng)用鹽水試驗法、白蛋白介質(zhì)法、酶技術(shù)、抗球蛋白試驗、低離子強度介質(zhì)法(Liss)、聚凝胺(Polybrene)法及凝膠法等各種技術(shù),再結(jié)合吸收、放散等血清學(xué)手段,對抗體的特異性作分析。 (4)要對譜細胞的反應(yīng)結(jié)果有正確的解釋,必須首先對一些特異性抗體的血清學(xué)特性進行了解,再分析反應(yīng)結(jié)果。確定抗體特異性時可以綜合運用以下的資料: 1)觀察受檢血清與每個試劑譜細胞的反應(yīng)結(jié)果。 2)觀察受檢血清與其自身細胞的反應(yīng)結(jié)果。 3)觀察受檢血清與酶處理細胞的反應(yīng)結(jié)果。 4)觀察反應(yīng)的格局,檢查各個反應(yīng)相的結(jié)果,包括不同的溫度、懸浮介質(zhì)或酶作用的情況,一些抗體的特異性與反應(yīng)介質(zhì)直接相關(guān)。 5)有否溶血現(xiàn)象。 6)在陽性反應(yīng)的細胞中,反應(yīng)強度有否不同,是否出現(xiàn)劑量效應(yīng)。 7)對自身紅細胞上的抗原詳細檢查,從所缺少的抗原情況,提示是否存在相應(yīng)的抗體。 (四) 具有自身抗體的患者血清學(xué)檢查 患者血清中存在的不規(guī)則抗體可分為兩類:一類是同種抗體,另一類是自身抗體。自身抗體又可分為冷自身抗體和溫自身抗體兩類。 1、患者血清中存在自身抗體的幾種情況及其對血清學(xué)試驗的影響 1.1 冷自身抗體 冷自身抗體是較常見的一種自身抗體,通常是IgM型的抗體,能在鹽水介質(zhì)中和自身紅細胞反應(yīng)。理論上講凡是37℃與自身紅細胞不反應(yīng),而只有在低于37℃環(huán)境下才能和自身紅細胞反應(yīng)的抗體均可稱為冷自身抗體。實際上,冷自身抗體大多數(shù)只能在很低的溫度下(例如4℃)與自身細胞反應(yīng)。因此,盡管大多數(shù)人的血清中都存在冷自身抗體,但在體內(nèi)溫度下,不會和自身細胞發(fā)生反應(yīng),也不會造成任何不良影響。 在_的病理情況下,患者的血清中存在極高效價的冷自身抗體,而且,在相對較高的溫度下(例如室溫)也能和自身細胞反應(yīng),這種情況會對患者血樣的定型和相關(guān)血清學(xué)檢查造成很大影響,有時也對輸血造成一定的影響。 1.2 溫自身抗體 溫自身抗體是指在37℃條件下能和自身紅細胞反應(yīng)的抗體。當患者血清中含有溫自身抗體時,患者一般均有些貧血或溶血癥狀。溫自身抗體可分為兩類:大多數(shù)情況下為lgG類溫自身抗體,極少數(shù)情況下也會存在IgM性質(zhì)的溫自身抗體。 患者血清里存在溫自身抗體,實際上將難以獲得在血清學(xué)上相配合的輸血。但這種情況特別要當心,因為自身抗體可能掩蓋同種抗體的存在,而同種抗體造成的輸血反應(yīng)很可能是致命的。因此,倘若時間容許,在輸血前應(yīng)排除自身抗體的影響,確定是否存在同種抗體。 2、自身抗體的處理和相關(guān)血清學(xué)檢查 2.1 冷自身抗體的血清學(xué)檢查 當懷疑患者血清中存在冷自身抗體時,可進行下列必要的檢查: (1)如果患者血清中的抗體在室溫(22℃左右)條件下和任何紅細胞都不發(fā)生反應(yīng),則可以認為該抗體無臨床意義,不需要做進一步的檢測。 (2)如果患者血清在室溫下和自身紅細胞反應(yīng),首先應(yīng)確認抗體的冷反應(yīng)性抗體特性可將被自身血清凝集的紅細胞分別置于37℃水浴和4℃冰箱中,當凝集在37℃完全散開而在4℃明顯增強時,可以認為該抗體是冷反應(yīng)性抗體。 (3)排除同種抗體,因為自身抗體可以掩蓋具有臨床意義的同種抗體,因此有必要確認血清中是否存在與自身細胞不反應(yīng)的同種抗體。確認的方法是用自身紅細胞在4℃進行吸收試驗。 (4) 在患者近期曾輸過血或沒有足夠的紅細胞等情況下,冷自身抗體吸收試驗難以進行,此時可以在嚴格的37℃條件下,以抗球蛋白試驗方法進行同種抗體篩選和鑒定試驗。 2.2 溫自身抗體的血清學(xué)檢查 溫自身抗體大多為IgG型抗體,因此患者直抗試驗中抗IgG往往為陽性,同時血清中的抗體在鹽水介質(zhì)中并不和自身或試劑紅細胞反應(yīng)。 (1)血清中是否存在溫自身抗體 許多具有溫自身抗體的患者,所有的溫自身抗體均已被自身紅細胞吸收.因此其血清中并沒有可測出的溫自身抗體。只有在自身紅細胞對溫自身抗體的吸收已經(jīng)飽和時,才可能在患者血清中出現(xiàn)溫自身抗體。 (2)自身吸收法排除同種抗體 在患者血清中存在較強的溫自身抗體時,溫自身抗體可能掩蓋同種抗體的存在,此時,可用自身吸收法測定同種抗體。 溫自身抗體吸收試驗的方法是:用經(jīng)過放散的自身細胞與自身血清在37℃反應(yīng)30min左右,檢測自身吸收是否完全。當吸收上清液與被徹底去除了自身抗體的自身細胞不反應(yīng),則證明自身吸收已完全,可以進一步進行同種抗體的檢測。 (3)異體細胞吸收法排除同種抗體 用異體細胞可以吸收自身抗體,但異體細胞也能吸收可能存在的同種抗體。 (4)稀釋技術(shù)在同種抗體的效價比存在的自身抗體效價高時,可以將患者血清進行適當?shù)南♂,以排除自身抗體的干擾,確定同種抗體特異性。 (五)交叉配血試驗 1、交叉配血試驗原則和方法 1.1 原則 除非極為緊急情況,輸血前病人(受血者)必須與獻血者(待輸血)進行交叉 ……(未完,全文共9505字,當前只顯示3814字,請閱讀下面提示信息。收藏臨床輸血前免疫血液學(xué)檢查) 上一篇:對補液的有關(guān)話題進行探討 下一篇:改革開放以來黨內(nèi)民主建設(shè)的主要成就與基本經(jīng)驗 相關(guān)欄目:督查 |